尼康將共聚焦成像提高到前所未有的水平

  尼康新的強大的全自動共聚焦成像系統(tǒng)，能夠高速高靈敏度地獲得細胞和分子事件的高質(zhì)量共聚焦圖像。前所未有的新光學電子技術(shù)創(chuàng)新設(shè)計使得A1擁有空前的系統(tǒng)質(zhì)量和靈活性，是適用于廣大用戶的理想工具。

 |  概述

 尼康A(chǔ)1共聚焦激光顯微鏡系統(tǒng)通過新的創(chuàng)造使得共聚焦成像達到一個新的質(zhì)量水準并具有多種功能。全自動的A1和高規(guī)格的A1R共2個型號可供選擇。A1使用傳統(tǒng)的成對檢流計來獲得高至4096x4096解析度的圖像， A1R引入一個獨特的混合掃描器系統(tǒng)提供貞速達30fps的512x512像素成像。可以便利的在超高速成像時得到卓絕的圖像質(zhì)量。此外，混合掃描器使得同步光活化和成像成為可能，這些對于揭示細胞動力學和相互作用都是至關(guān)重要的。 

 |  獨特的混合掃描技術(shù)

 ? 420fps的超高速成像

   A1R加入了一個共振頻率為7.8kHz的共振掃描器來達到420 fps (512 x 32像素) 的高速成像。在512X512分辨率下可達到30fps。并且，共振掃描器視野區(qū)域和檢流計掃描器視野區(qū)域完全重合，常規(guī)檢流計掃描器也可達到10fps（512X512）的速度。尼康獨創(chuàng)的光學時鐘產(chǎn)生方法在最高速度時也能實現(xiàn)高的圖像質(zhì)量。其光纖通訊數(shù)據(jù)傳輸系統(tǒng)最高傳輸速度可達4 Gbit/s。

極高的速度可實時觀察血流中細胞的移動（紅色：血管；綠色：細胞核，120pfs）

 ? 光活化同步高速成像

  高速光活化成像由于非共振掃描器和共振掃描器集成在一個單元里，不需要另配獨立的用來做光活化的激光器，光活化和熒光成像就可以同時進行。擁有可以高速成像的共振掃描器使得光活化后快速變化信號的獲取成為可能。

光活化釋放組胺而引起細胞內(nèi)的鈣離子濃度發(fā)生變化，上圖顯示Yellow Cameleon 3.60 CFP、YFP兩基團發(fā)生FRET現(xiàn)象的過程（使用457nm激光成像，拍攝速度光活化同步成像速度30pfs）。  

何為混合式掃描頭

  尼康獨有的混合式掃描頭同時配備檢流計與共振式掃描裝置，并允許通過超高速選擇器靈活轉(zhuǎn)換使用或者同時使用兩組掃描裝置。

 ? 常規(guī)檢流計掃描器獲得高分辨率圖像

       檢流計掃描器單次掃描可獲得高達4096X4096分辨率。同時借助新開發(fā)的驅(qū)動與采樣系統(tǒng)，及圖像校正科技，可以10pfs（512X512）的速度高速獲取圖像。

四色標記斑馬魚圖像（藍：胞核、綠：瞳孔、黃：神經(jīng)、紅：肌肉）

 |  增強的螢光探測效率

   掃描頭中的二向色鏡采用平均98%透射率的低角度二向色鏡，熒光強度得到30%的增強。

  同時采用尼康獨有的六邊形針孔相對于傳統(tǒng)的方形針孔熒光采集量可提高30%。

  尼康獨特的光學設(shè)計使成像更明亮。這樣可以使激光曝光強度最小化，減少了細胞損傷。 

 |  磷砷化鎵（GaAsP）高靈敏度探測器 

   尼康研發(fā)的磷砷化鎵多通道熒光探測器配備兩通道GaAsP高靈敏度檢測器與兩通道普通PMT檢測器。檢測波長范圍達到400-750nm。

   GaAs PMT的量子效率可提高一倍。遠優(yōu)于普通PMT。

  GaAsP PMT的靈敏度遠高于普通PMT，即使是過去所很難拍攝的弱熒光樣品也可獲得具有極低背景噪聲的高亮度圖像。

 |  獲取明亮清晰圖像的VAAS針孔元件

  尼康開發(fā)了一項稱為虛擬可調(diào)孔徑系統(tǒng)（VAAS）的創(chuàng)新技術(shù)，能在保持圖像亮度的情況下去除模糊。針對通過針孔的光和非通過針孔的光進行去卷積，得到更明亮的圖像，從而提高信噪比。

 |  易用的強大功能

  使用NIS-Elements C控制軟件將共聚焦成像系統(tǒng)、顯微鏡及周邊設(shè)備合為一體，并具備簡單直觀的操作界面。同時提供可靠全面的后期分析功能。

基礎(chǔ)設(shè)置

光路設(shè)置

   以Ti-E倒置顯微鏡為基礎(chǔ)可將共聚焦系統(tǒng)與N-SIM/N-STORM 超分辨率系統(tǒng)、TIRF系統(tǒng)、光譜檢測與完美對焦系統(tǒng)整合提供多模式的成像方案。同時所有的系統(tǒng)都可在同一NIS-Elements平臺下完美工作。